Avaliação histopatológica e da expressão da proteína surfactante tipo-B no pulmão de ratos wistar submetidpos à sepse

Abstract

O surfactante pulmonar é uma substância lipoproteica, produzida por pneumócito tipo II, cuja função é reduzir a tensão superficial nos pulmões e facilitar a ventilação. Durante a sepse, o pulmão é um órgão-alvo de muitas Espécies Reativas (ER), as quais interferem no balanço oxiredox, expressão gênica, síntese proteica e divisão celular. O presente estudo se propôs a investigar a influência da coadministração da ceftriaxona (30mg/kg, i.p) e antioxidantes ácido ascórbico (50 mg/kg), N-acetil cisteína (10mg/kg) e alfa tocoferol (20 mg/kg), na lesão pulmonar e na expressão da proteína surfactante pulmonar tipo-B (SP-B), em modelo experimental de sepse. Para isso, Ratos Wistar machos (300-350g) foram aleatoriamente divididos em cinco grupos (n=10 animais/grupo) e tratados durante cinco dias consecutivos, de acordo com os respectivos grupos: i) placebo não tratado (SHAM); ii) placebo tratado com ceftriaxona (SHAM+ATB); iii) séptico (CLP) não tratado; iv) séptico tratado com ceftriaxona (CLP+ATB) e v) séptico tratado com ceftriaxona + antioxidantes simultaneamente (CLP+ATB+AO). Na histologia, o pulmão revelou parênquima morfologicamente normal no grupo SHAM; enquanto no grupo CLP verificou-se septos interalveolares muito espessados (presença de edema), infiltrado inflamatório polimorfonuclear. No grupo CLP+ATB, verificou- se septos interalveolares poucos espessados (pouco edema), leve infiltrado leucocitário, sem alterações morfológicas alveolares. Já no grupo CLP+ATB+AO, verificou-se septos interalveolares morfologicamente normais, sem alterações morfológicas alveolares e sem infiltrado inflamatório. A análise imuno-histoquímica revelou uma diminuição significativa (p <0,05) da expressão da proteína SP-B no grupo CLP (13,25±3,40 marcações/campo); enquanto que os grupos CLP+ATB (56,75±20,25 marcações/campo) e CLP+ATB+AO (56,75±20,25 marcações/campo) apresentaram aumento significativo (p <0,05) da expressão da SP-B em relação ao grupo CLP. No que se refere à expressão da SP-B no LBA, através da técnica de Western blotting, apenas identificou-se possíveis oligômeros dessa proteína. Portanto, é possível afirmar que os grupos CLP+ATB e CLP+ATB+AO mostraram aumento na expressão da SP-B no parênquima pulmonar e nas doses utilizadas, a coadministração de ATB+AO foi melhor do que administração isolada de ATB para mitigar a lesão pulmonar induzida pela sepse em ratos Wistar.