Atividade sinérgica entre β-lapachona e antimicrobianos frente a Enterococcus faecalis vancomicina resistentes: efeito sobre a formação do biofilme e ultra-estrutura

Abstract

Enterococcus vancomicina resistentes (EVR) têm emergido em todo o mundo, como causa importante de infecções nosocomiais, o que tem preocupado os órgãos governamentais ligados a saúde pública devido ao aumento da relação morbidade/mortalidade associadas às infecções por EVR. Desta forma, o presente estudo teve por objetivo, a avaliação da atividade antimicrobiana de naftoquinonas (lapachol, α e β-lapachona) e de cinco agentes antimicrobianos (vancomicina, gentamicina, ampicilina, ciprofloxacino e linezolida) sobre cepas de Enterococcus faecalis multirresistentes (n=11) sendo uma ATCC 51299. Numa primeira etapa foi determinada a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e bactericida mínima (CBM) destas substâncias e em seguida foi avaliada a interação dos antimicrobianos associados a β-lapachona pelo método Checkerboard. Os critérios utilizados para avaliar a atividade de interação foram definidos pelo Índice de Concentração Inibitória Fracionada (Índice CIF). Por fim, a cinética bactericida, alterações ultraestruturais e a atividade a antibiofilme β-lapachona utilizada na CIM foi avaliada sobre Enterococcus faecalis ATCC 51299. As cepas de Enterococcus faecalis mostraram-se resistentes a todos os antimicrobianos testados, com valores de CIMs que variaram de 16 a 1024 μg/mL. Dentre as naftoquinonas, a β-lapachona foi mais ativa (CIM 320 – 160 μg/mL). Às associações foram sinérgicas, em sua maioria, com

valores de ICIF que variaram de 0,04 a 0,75. Após 24 horas de exposição à β- lapachona – vancomicina foi observado um decréscimo no crescimento de

Enterococcus faecalis ATCC 51299 de aproximadamente 2 log10 das Unidades Formadoras de Colônias/mL. Através da microscopia eletrônica verificou-se alterações da parede, membranas celulares, do conteúdo citoplasmático e lise celular. Também foi possível constatar inibição de aproximadamente 60% da formação do biofilme. Foi observado que, em sua grande maioria, as associações contendo β-lapachona agem sinergicamente sobre a viabilidade e formação do biofilme de cepas Enterococcus faecalis.