Avaliação in silico e in vitro dos mecanismos celulares e moleculares de derivados fenoxi-hidrazino-tiazóis candidatos a fármacos tripanocidas

Abstract

A doença de Chagas é considerada neglig enciada e possui como agente etiológico oTrypanosoma cruzi. O seu tratamento é feito com o benzonidazol (Bzn), o qual é muito tóxico e mais efetivo apenas na fase aguda da doença, sendo a descoberta de fármacos mais eficazes e menos tóxicos um desafio. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi investigar in silico e in vitro treze novos compostos fenoxi-hidrazino-tiazóis. Para avaliação in silico, foram utilizadas plataformas para busca de possíveis alvos de atividade biológica. Além disso, foi realizado o docking molecular frente a alvos de T. cruzi, citotoxicidade e do sistema imune. Foi avaliada a citotoxicidade celular, a atividade tripanocida, a produção de óxido nítrico (ON), a morte celular e a imunomodulação dos compostos testados. Após o docking em alvos de T. cruzi, foi verificada maior afinidade predita dos compostos pelas enzimas esqualeno sintase e 14-alfa demetilase. No docking com as enzimas monoamina oxidase A e B, verificou-se a afinidade predita para JM-13. No docking com alvos do sistema imune, verificou-se maior afinidade predita dos compostos por TLR2 e TLR4. No geral, os compostos foram pouco tóxicos in vitro para a maioria dos tipos celulares testados. O composto mais ativo para epimastigotas foi LIZ- 531 (2,8 μM), para tripomastigotas foi LIZ-311 (8,6 μM) e para amastigotas foi LIZ-331 (1,9 μM). Houve indução da produção de ON na concentração de 200 μg/mL por LIZ- 311 (2,5μM), LIZ-431 (4,1 μM) e LIZ-531 (5 μM) e JM-14 induziu a produção de ON nas 3 maiores concentrações testadas. Avaliando a produção de citocinas, LIZ-331 induziu a produção de TNF e IL-6, já LIZ-311, de TNF, IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-10, IL-17. O composto LIZ-311 induziu morte celular principalmente por apoptose, diminuindo compartimentos ácidos e o potencial de membrana mitocondrial. Diante do exposto, verifica-se o potencial de LIZ-311, pois além da atividade antiparasitária, foi pouco tóxico, com potencial imunomodulador in silico e in vitro, além de induzir a morte parasitária por via apoptótica.