Avaliação de atividade antifúngica da lectina de folhas de bauhinia monandra (BmoLL)

Abstract

Lectinas são proteínas que possuem sítios de ligação a carboidratos, capazes de interagir reversivelmente e especificamente com esses açúcares. As lectinas isoladas a partir de plantas do gênero Bauhinia demonstraram variadas atividades, como por exemplo atividade anticâncer, inseticida, e também antifúngica. Bauhinia monandra, espécie conhecida popularmente como pata- de-vaca, é uma planta ornamental da família das Fabaceae usada na medicina popular como hipoglicemiante e da qual também foram isoladas lectinas. O objetivo deste trabalho foi descrever a atividade antifúngica da lectina de folhas de Bauhinia monandra, BmoLL, bem como sua ação no tratamento de biofilme formado por leveduras do gênero Candida. O método utilizado seguiu as condições descritas no documento do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, 2008). A lectina BmoLL foi preparada e utilizada na faixa de 0,96 g/mL a 492 L. Para os testes, foram utilizadas placas de microtitulação de 96 poços de fundo plano ção de lectina testada estavam nas colunas 1 a 10. Meio RPMI 1640 ( ) foram distribuídos nas colunas 11 e 12, que foram utilizadas como controle de crescimento e esterilização, respectivamente. A leitura foi realizada depois de 24 h para espécies de Candida spp. e 48 h para espécies de Cryptococcus spp. Para o ensaio de biofilme as leveduras produtoras de biofilme foram cultivadas em Yeast Extract Peptone (YPD) a 37°C overnight; em seguida foram suspensas em meio RPMI tamponado com HEPES e ajustadas para concentração de 106 células/mL. A quantificação dos biofilmes foi realizada com o ensaio de redução de sal tetrazólico, as placas foram então incubadas em temperatura de 37°C por 48 h, e a leitura foi realizada com comprimento de onda 540 nm. Após o período de 48 h de crescimento do biofilme, o conteúdo dos poços foi transferido para uma nova placa e os poços da mesma foram preenchidos com 180 μL da solução contendo a lectina BmoLL diluída em RPMI 1640. Após 18 h de ação, a leitura foi realizada com comprimento de onda 540 nm. Para a análise, o teste de comparações múltiplas de Tukey foi realizado para todas as médias obtidas com o nível de significância de 5%. A BmoLL apresentou potencial inibitório do crescimento das leveduras de Candida e Cryptococcus em concentrações que variaram de 246 a 492 L e também foi capaz de inibir a continuação da formação e aumento do biofilme de Candida parapsilosis na concentração de 492 L.