Caracterização química e avaliação da toxicidade aguda e genotoxicidade de extrato aquoso de folhas de Anacardium occidentale

Abstract

As plantas são importantes na alimentação humana e no combate a diversas enfermidades. Entretanto, contrapondo os benefícios, as plantas também estão entre as principais causas de envenenamento. Anacardium occidentale, pertencente à família Anacardiaceae e conhecida popularmente como cajueiro, é uma planta nativa do nordeste do Brasil cujas folhas, casca, caule e raízes têm sido usadas para tratamento de inúmeras enfermidades. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar quimicamente e avaliar a segurança de extrato aquoso de folhas de A. occidentale através de ensaios de toxicidade aguda e genotoxicidade in vivo. Condições otimizadas para extração de polifenóis foram determinadas através de planejamento fatorial variando o método de extração (maceração ou turbólise) e proporção de droga vegetal (5% ou 10%, p/v) em relação ao volume de solvente (água destilada). ET10% (extrato obtido por turbólise e usando 10%, p/v de material vegetal) foi avaliado quanto às concentrações de taninos e proteínas e realizada análise em cromatografia líquida de alta eficiência. Presença de lectinas em ET10% foi avaliada através de ensaio de atividade hemaglutinante (AH) e de inibição da AH. Toxicidade aguda e genotoxicidade de ET10% em camundongos foram investigadas utilizando uma dose de 2000 mg/kg por via oral. ET10% apresentou maior teor (26,61 ± 0,080 %g) de polifenóis e gráficos de Pareto e de resposta de superfície evidenciaram uma correlação positiva deste método de extração com a maior presença destes metabólitos. O rendimento da extração foi de 24,6 ± 0,82%, e o teor de taninos foi de 32,2 mg EAT/g. A análise por CLAE evidenciou a presença de diversos picos em ET10% que apresentam características de taninos hidrolisáveis e flavonoides, bem como indicou teores de ácido gálico e rutina de 0,61 ± 0,0096% (1,57%) e 0,22 ± 0,0001% (0,52%), respectivamente. A concentração de proteínas foi de 14,58 mg/mL e foi detectada uma atividade hemaglutinante específica de 8989,84, que foi inibida por azocaseína, caseína, albumina, N-acetilglicosamina e metil manopiranosideo. No ensaio de toxicidade aguda, não foram observadas alterações comportamentais, no consumo de água e ração, no peso dos animais e nem em parâmetros hematológicos e bioquímicos do sangue dos animais tratados com ET10% em comparação com o controle negativo. Análise histológica demonstrou ausência de características relacionadas à toxicidade no fígado, rins e baço dos animais tratados e do controle. Nenhum dos animais morreu durante o experimento, indicando uma DL50 acima de 2000 mg/kg (baixa ou nenhuma toxicidade). Nos ensaios cometa e de micronúcleo, também não foram encontradas diferenças significativas entre o grupo tratado com ET10% e o controle no que diz respeito ao índice e frequência de dano genético e quantidade de eritrócitos micronucleados. Em conclusão, extrato aquoso de A. occidentale (ET10%) apresentou maior teor de fenóis totais. Ainda, elevadas quantidades de proteínas e taninos foram detectadas, bem como a presença de lectinas, resultados semelhantes aos obtidos para outras plantas anacardiáceas. ET10% não apresentou toxicidade aguda oral e nem genotoxicidade, sugerindo o uso seguro das folhas desta planta nas condições de extração usadas e indicando o potencial para futuras avaliações de atividades farmacológicas.