Avaliação da toxicidade aguda, atividade gastroprotetora e antinfúngica de extrato seco das folhas de Croton blanchetianus Baill e estudo de pré-formulação de grânulo efervescente

Abstract

Os compostos bioativos, presentes em espécies vegetais, são utilizados na indústria de cosméticos, alimentícia, bem como na indústria farmacêutica, fazendo parte de diversos medicamentos. Croton blanchetianus é uma espécie encontrada na caatinga, com o clima seco e quente predominante do semiárido, conhecida popularmente como marmeleiro. Visando obter mais conhecimentos sobre a espécie, o trabalho teve como objetivo avaliar o perfil fitoquímico, propriedades físico-químicas, toxicidade e atividade gastroprotetora e antimicrobiana de formulação efervescente contendo extrato das folhas de C. blanchetianus. O material vegetal (folhas) foi obtido em Pernambuco, seco em estufa (40 °C) e em seguida triturado em moinho de facas. As análises físico-químicas (umidade, cinzas totais e granulometria) foram realizadas de acordo com a Farmacopeia Brasileira. Posteriormente, o método por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foi validado para a matéria-prima vegetal. O estudo de sazonalidade também foi realizado, avaliando as propriedades fitoquimicas e físico- químicas. Os extratos líquidos (EL) foram obtidos por turbólise utilizando planejamento de misturas, com etanol, água e acetona, e, suas misturas binárias e terciárias, os quais foram avaliados por cromatografia camada delgada (CCD) e CLAE, bem como determinado o teor de polifenóis (TPT), flavonoides totais (TFT) e o resíduo seco (RS). Após a escolha do solvente, o processo de secagem por spray dryer foi estudado, empregando adjuvantes de secagem (dióxido de sílico coloidal/maltodextrina em mistura 1:1, em relação ao RS). Em seguida, os parâmetros de secagem foram avaliados a partir de um fatorial 22 com ponto central, considerando o fluxo de alimentação (L/h) e temperatura de entrada (°C) como variáveis independentes, com a mesma vazão de ar de 30 L/min. As respostas analisadas foram perfil por CCD e CLAE, TPT, TFT, bem como as propriedades tecnológicas (densidade aparente e compactada, ângulo de repouso e umidade). Diante da escolha do melhor extrato seco (ESA), foi realizado o ensaio de toxicidade aguda. As pré-formulações foram obtidas em 4 formulações efervescente, utilizando o extrato seco otimizado de C. blanchetianus, lactose, bicarbonato de sódio, ácido cítrico, ácido tartárico e PVP em diferentes proporções. Após obtido o ESA e o grânulo efervescente (G.E), o teste de atividade gastroprotetora foi realizado, utilizando-se o álcool para indução das úlceras e três concentrações do ESA para tratamento, realizou-se a medição das lesões, análise histopatológica dos estômagos. Por fim, foi realizada a covalidação do método por CLAE para o ESA, EL e a formulação efervescente escolhida. O material vegetal apresentou as análises físico-químicas dentro dos valores recomendados pela Farmacopeia Brasileira. O método por CLAE foi validado, apresentando-se linear, robusto, exato e preciso, estando dentro dos parâmetros da resolução vigente. O perfil por CCD evidenciou a presença de flavonoides, derivados cinâmicos, saponinas e taninos condensados. A amostra de junho (2022) do estudo de sazonalidade foi a que apresentou melhores teores de flavonoides e polifenóis. O melhor solvente extrativo foi a mistura água e acetona (1:1 v/v), com melhor extração de flavonoides, e melhores respostas para o RS e o TPT, observados no planejamento de misturas. Em relação ao processo de secagem, o adjuvante maltodextrina não apresentou interferência na extração de flavonoides. A respeito das propriedades tecnológicas, os ESAs mostraram-se pobres em relação ao fluxo, e a utilização de maltodextrina favoreceu alguns parâmetros. Na análise térmica, o ESA com maltodextrina foi o que apresentou melhor estabilidade térmica. Na microscopia eletrônica, os extratos apresentaram partículas irregulares, de tamanhos diferentes. Com a utilização de planejamento fatorial foi possível obter um extrato seco com melhores características reológicas, com vazão de 0,5L/h e temperatura de 150 °C, sem ocorrer prejuízo ao perfil químico do extrato. A formulação efervescente escolhida para prosseguir com o ensaio farmacológico apresentou melhora nas propriedades reológicas do ESA após a obtenção dos grânulos. Por fim, a utilização de PVP nas formulações evidenciou a perda de alguns flavonoides, sendo retirado da formulação final. No teste da gastroproteção, o ESA apresentou efeito na concentração de 50, 100 e 200 mg/kg. Além disso, o ESA e o G.E. apresentaram atividades antimicrobianas para cepas de Candida spp. A covalidação do método para o ESA, EL e a formulação efervescente foi considerada precisa e exata. Diante dos resultados, é possível deferir que os extratos das folhas de C. blanchetianus se mostraram eficientes quanto a extração de polifenóis, principalmente flavonoides; estabilidade térmica, dose segura, efeito gastroprotetor e antimicrobiano, possibilitando a obtenção do granulado como insumo em futuras formulações farmacêuticas.