Investigação das propriedades bioativas de peptídeos extraídos de microrganismos fotossintetizantes

Abstract

As microalgas são microrganismos fotoautotróficos, e destacam-se devido a biomassa rica em proteínas e peptídeos bioativos. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi analisar peptídeos obtidos de microalgas após extração e avaliar seu potencial anti-hipertensivo, antioxidante e antimicrobiano. Foi realizado o cultivo autotrófico das microalgas Chlorella vulgaris, Tetradesmus obliquus e Dunaliella tertiolecta que ao atingir a fase estacionária de crescimento, tiveram as biomassas liofilizadas e submetidas à hidrolise enzimática (digestão in vitro), física (Sonicação) e química (Acido e base). Todos os extratos resultantes foram ultrafiltradoa em membranas de 3 kDa e os peptídeos permeados foram analisados frente a inibição da enzima conversora de angiotensina (iECA). Posteriormente, utilizando os peptídeos com melhor resultado, foi realizado o ensaio antioxidante, determinado pelos métodos ABTS, DPPH, O2 e OH e a atividade antimicrobiana por meio do método CIM (concentração inibitória mínima) frente às bactérias patogênicas Gram positivas e negativas. Os peptídeos com eficientes bioatividades foram analisados por LC-MS/MS. Dentre os métodos utilizados o enzimático se mostrou mais eficiente. Entre os resultados, os peptídeos da C. vulgaris demonstraram melhor atividade de inibição da ECA com 88,18±0,16% a 1 mg/mL. Comprovado pela IC50 da C. vulgaris 0,563 ± 0,29. Para atividade antioxidante, pelo método ABTS, a C. vulgaris apresentou atividade com menores concentrações peptídicas IC50 0,477 ± 0,07, enquanto T. obliquus registrou IC50 0,618 ± 0,11, seguido da D. tertiolecta com necessidade de maior quantidade de peptídeos. Pelo método do DPPH, peptídeos obtidos da T. obliquus apresentaram a menor IC50 0.511 ± 0,09, seguidos daqueles obtidos da C. vulgaris e D. tertiolecta com IC50 de 0.783 ± 0,23 e1.551 ± 0,05, respectivamente. Em relação as técnicas com os radicais OH e O2, a C. vulgaris mostrou menor IC50 para o radical OH (1.092 ± 0,02), enquanto o radical O2, tanto C. vulgaris quanto T. obliquus apresentaram valores próximos, e para D. tertiolecta sendo necessário concentrações mais elevada de peptídeos. A microalga C. vulgaris destacou-se, mediante sua estabilidade e baixa redução na atividade mediante sua concentração. No contexto da atividade antimicrobiana, as microalgas inibiram cepas patogênicas, com destaque para T. obliquus, que apresentou consistentemente resultados elevados em diferentes concentrações e frente a diferentes bactérias gram-positivas. A C. vulgaris mostrou eficácia, principalmente em concentrações contendo 2mg/mL. Em contrapartida, D. tertiolecta exibiu atividade antimicrobiana moderada, com melhor inibição para Listeria monocitogenes. Para o perfil químico, utilizou-se as amostras com melhor bioatividade, referentes a C. vulgaris. De acordo com a análise via LC-MS/MS, tanto no modo positivo quanto negativo, pode-se inferir em 2 picos principais referentes à peptídeos nas amostras menor que 3 kDa. Os resultados demonstram que os peptídeos < 3 kDa obtidos das microalgas após a hidrólise enzimática, podem ser consideradas uma fonte em potencial de bioativos com propriedades antimicrobiana, antioxidante e anti-hipertensivo. Tais descobertas permitem agregar valor aos peptídeos de microalgas com perspectivas promissoras referentes ao seu uso na indústria alimentícia e farmacêutica, visando à promoção da saúde.