Caracterização polifásica, descrição epidemiológica e análise de mecanismos de reversão de resistência fúngica a triazólicos de isolados clínicos de Candida sp. a partir de derivados piridil-tiazolidinonas

Abstract

A Candidíase Invasiva (CI) representa um sério problema de saúde pública devido as altas taxas de morbimortalidade. Os triazólicos são frequentemente utilizados na terapia desta infecção, o que fez com que nos últimos anos, espécies de Candida tenham desenvolvido resistência. A resistência fúngica limita as opções terapêuticas e o tratamento combinado é considerado uma estratégia relevante. Neste sentido, Derivados Piridil-tiazolidinonas (DPTs) surgem como uma alternativa devido à atividade antimicrobiana descrita de seus farmacóforos. Assim, este estudo teve como objetivo caracterizar isolados clínicos de Candida por abordagem polifásica, descrever o perfil clínico-epidemiológico dos casos envolvidos e analisar os mecanismos de reversão da resistência fúngica a triazólicos utilizando DPTs visando propor uma nova alternativa terapêutica. O diagnóstico da CI foi realizado por metodologia convencional. As colônias de Candida spp. foram isoladas e identificadas utilizando ágar cromogênico, sistema automatizado e proteômica. O mapeamento epidemiológico dos pacientes envolvidos na pesquisa foi realizado por análise de prontuário. O perfil de susceptibilidade das cepas ao Fluconazol (FLC), Voriconazol (VRC), isavuconazol e aos DPTs foi avaliado por microdiluição em caldo. A reversão da resistência foi avaliada por teste tabuleiro de xadrez com FLC, VRC e o composto DPT mais bioativo isoladamente. Os níveis de expressão relativa de ERG11, CDR1, CDR2 e MDR1 foram avaliados em dois isolados de Candida resistentes a FLC e VRC sob diferentes condições de exposição antifúngica. A CI foi confirmada em 24 pacientes, sendo treze (53%) mulheres. Hipertensão arterial sistêmica, diabetes mellitus, câncer, uso de antibioticoterapia, de dispositivos invasivos e cirurgia prévia foram associados a esta infecção. Foram incluídas na pesquisa 48 cepas de Candida spp., com a proteômica identificando 14 (29%) cepas de C. albicans, onze cepas emergentes de C. auris (23%), e uma (2% cada) cepa de C. duobushaemulonii, C. guilliermondii, C. lusitaniae, C. nivariensis e C. pelliculosa. Sete (14%) e 11 (23%) cepas se apresentaram como Resistentes (R) ou Non-Wild Type (NWT) ao FLC e VRC, respectivamente. Todas as cepas demonstraram ser selvagens ao isavuconazol, evidenciando a excelente atividade deste novo triazol. Seis DPTs apresentaram perfil anti-Candida eficiente, com destaque para o composto ((Z)-2-((E)-(1-(pyridin-2-yl)ethylidene)hydrazono)thiazolidin-4-one) (19) que apresentou uma Concentração Inibitória Mínima modal de 3,2 μg/mL. Observou-se Interação Sinérgica Fungistática (ISFi50%) com o composto 19 em cinco (71%) isolados R/NWT ao FLC. Para o VRC, quatro (36%) isolados R/NWT apresentaram ISFi50% e dois (18%) interação sinérgica fungicida. A resistência de C. tropicalis BS 06 (URM 8626) foi confirmada por superexpressão dos genes ERG11, CDR1 e CDR2; em C. albicans BS 36 (URM 8629) por upregulation do gene CDR2. O derivado 2 acetil-piridina (19) promoveu a reversão da resistência em ambos os isolados por downregulation dos genes ERG11, CDR1 e CDR2. Este estudo relatou a segunda ocorrência de C. nivariensis no Brasil e a primeira de C. auris em Pernambuco. Além do que, demonstrou a capacidade antifúngica e moduladora do composto 19 sob genes ligados a resistência fúngica, sugerindo seu potencial como uma nova terapia complementar para CI.