Análises dos efeitos da dietilcarbamazina (DEC) sobre a fibrose hepática em camundongos C57BL/6J wild type

Abstract

Estudos farmacológicos mostram que a Dietilcarbamazina (DEC) interfere no metabolismo do ácido araquidônico atuando como um fármaco anti-inflamatório. O objetivo deste estudo foi examinar o efeito da DEC sobre a fibrose hepática induzida pelo tetracloreto de carbono (CCl4). Quarenta camundongos machos da linhagem C57BL/6J foram divididos em 4 grupos experimentais (n=10/grupo): (1) grupo controle, (2) grupo DEC 50 mg/kg (3) grupo CCl4 e (4) grupo CCl4+DEC 50mg/kg. A solução de DEC (50mg/kg) foi diluída nos bebedouros dos animais em volume total de 150 ml, por 12 dias. A fibrose foi induzida pelo CCl4 (0,5μl/g) por 8 semanas (2 injeções por semana). Após o esquema terapêutico, os animais foram eutanasiados e fragmentos hepáticos foram processados para histopatologia (HE), histoquímica para colágeno (Sirius red), ultraestrutura, imunohistoquímica, western blot e RT-qPCR. Nos resultados histopatológicos do grupo controle e grupo DEC 50mg/kg não apresentaram alterações em sua morfologia padrão. No grupo dos animais expostos ao CCl4 foi observada marcante degeneração citoplasmática e nuclear, com a presença de fibrose e infiltrados inflamatórios. Através da microscopia eletrônica foi possível observar mitocôndrias em degeneração, rompimento do retículo endoplasmático e grande presença de lipídeos. Os animais tratados com CCl4+DEC, mostraram uma diminuição de todas as lesões observadas no grupo CCl4. Na marcação para colágeno do grupo CCl4, observou-se intensa marcação nas áreas fibróticas. No entanto, o grupo CCl4+DEC apresentou redução da marcação de colágeno, semelhantemente ao grupo controle. Resultados da imunohistoquímica revelaram aumento da expressão de COX-2, α-SMA, TGF-β, p-JNK e p-p38 nas áreas fibróticas e nos infiltrados mononucleares, principalmente em áreas perivenulares no grupo CCl4. O tratamento com 50mg/kg de DEC promoveu a redução da imunoreatividade desses marcadores. Análises realizadas por western blot e RT-qPCR mostraram aumento da expressão dos marcadores fibróticos como α-SMA, TGF-β, colágeno-1, MMP2 e TIMP1, bem como das proteínas da via das MAPKs como p-JNK e p-p38 no grupo CCl4 e uma significativa redução da expressão destas proteínas após tratamento com DEC 50mg/kg. De acordo com o presente estudo, a DEC é uma possível alternativa terapêutica para a fibrose hepática.