Purificação parcial de uma lectina da raiz de Guettarda platypoda

Abstract

Lectinas, proteínas ou glicoproteínas que se ligam reversivelmente a carboidratos com diferentes graus de seletividade, são encontradas em uma variedade de organismos e estão envolvidas em numerosos processos celulares. Neste trabalho foi avaliada a presença de lectina(s) em Guettarda platypoda D. C., planta conhecida vulgarmente como angélica . As raízes dessa planta têm sido utilizadas em medicina popular para o tratamento de diferentes enfermidades. Extratos brutos a 10% (p/v) de raízes íntegras, entrecasca da raiz, folhas, flores, frutos, pecíolos, pedúnculos, caules, ramificação do caule e gemas foram obtidos em NaCl 0,15 M; extratos da entrecasca da raiz foram ainda avaliados em diferentes tampões e valores de pH (citrato-fosfato pH 3,0-7,0; TRIS-HCl pH 7,5-9,0; fosfato de sódio pH 6,0- 7,5). Todos os extratos foram submetidos a fracionamento com sulfato de amônio (F 0-60%), diálise e ensaios de atividade hemaglutinante (AH) com diferentes tipos de eritrócitos. Todos os tecidos avaliados apresentaram atividade hemaglutinante; folhas e gemas revelaram as maiores atividades hemaglutinante específicas com eritrócitos glutarizados de coelho. A fração selecionada com a lectina da entrecasca da raiz (GplaRL) foi obtida em tampão citrato-fosfato 0,01 M em NaCl 0,15 M (pH 5,5). AH de GplaRL foi parcialmente inibida com glicose e sacarose. O grau de pureza foi avaliado através de eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) para proteínas nativas ácidas e em condições desnaturantes/redutoras; foram reveladas duas bandas. GplaRL foi adsorvida em coluna cromatográfica de quitina, levando à obtenção de um pico, o qual revelou uma única banda em PAGE para proteínas nativas ácidas. GplaRL parece ser a primeira lectina mencionada no gênero Gettarda