Avaliação do metabolismo energético de mitocôndrias hepáticas de ratos submetidos à desnutrição proteica perinatal

Abstract

O moderno estilo de vida tem contribuído para o aumento de doenças crônicodegenerativas na vida adulta. Sabe-se, porém, que este é um fator que se reflete desde a infância. Estudos já apontam que crianças desnutridas são mais propensas a desenvolverem obesidade e doenças correlatas na vida adulta devido a alterações metabólicas. Nos últimos 50 anos as mitocôndrias têm emergido como fonte de sinalização, injúria e morte celular, no entanto os mecanismos relacionados à desnutrição, disfunção mitocondrial e o risco de doenças crônicas na vida adulta ainda são escassos. O presente estudo teve como objetivo verificar como a restrição protética durante o período crítico do desenvolvimento (gestação e lactação) afeta o metabolismo energético de mitocôndrias hepáticas de ratos jovens. Fêmeas foram divididas em dois grupos de acordo com a dieta. Grupo controle (caseína a 17% durante o período de gestação e lactação) e um grupo desnutrido (caseína a 8% durante o mesmo período). Após esse período, os animais machos de cada grupo receberam dieta de laboratório (Labina-Purina®). Aos 30 dias de vida, os animais de ambos os grupos foram sacrificados, o fígado imediatamente removido e as mitocôndrias isoladas. Avaliamos o controle respiratório (n=5), velocidade de fosforilação (Estado 3) (n=5), velocidade de repouso (Estado 4) (n=5) e velocidade de respiração no estado desacoplado (n=5), inchamento mitocondrial (n=5), potencial elétrico de membrana mitocondrial (∆ᴪm) (n=3), produção de espécies reativas (ER) (n=5) e captação de cálcio (n=3). A análise estatística foi realizada através do teste “t” de Student não pareado. Nossos resultados mostraram uma diminuição de 27,53% no estado 3 (p<0.05) e diminuição de 39,44% do controle respiratório (p<0.05) no grupo desnutrido quando comparado com o grupo controle. O grupo desnutrido também mostrou uma menor capacidade de manutenção do ∆ᴪm (Controle: 6,235 min ± 0,1366vsDesnutrido: 2,117 min ± 0,6868, p<0,05) e aumento na produção de ER de 3 vezes (p<0,05), sensível a EGTA (quelante de cálcio). Também foi possível observar um significativo inchamento mitocondrial (Controle: 1,03 ± 0,08 vs Desnutrido: 0,52 ± 0,08, p<0,05) e menor capacidade de retenção de cálcio, no grupo desnutrido em relação ao controle (Controle: 10,7 ± 0,85 min vs Desnutrido: 5,81 ± 0,72 min) (p<0,05). Estes efeitos foram sensíveis a ciclosporina A, um inibidor clássico do poro de transição de permeabilidade mitocondrial. Nossos dados sugerem que a restrição proteica perinatal induz transição de permeabilidade mitocondrial de forma que diminui o controle respiratório e estimula a produção de espécies reativas em fígado de ratos jovens