Avaliação do papel da NADPH oxidase na nefrogênese normal e na indução de retardo da nefrogênese pela inflamação materna em ratos

Abstract

A inflamação materna é uma condição correlacionada com prejuízo no desenvolvimento do feto e programação de hipertensão na vida adulta. O aumento do estresse oxidativo é um fator que parece permear esse mecanismo de programação. Contudo, em situações controle, espécies reativas de oxigênio também são importantes na interface mãe/feto. A NADPH oxidase tem um papel importante na produção de espécies reativas de oxigênio em vários tipos celulares, tornando-a um importante alvo. Dessa forma, é importante que se investigue o papel do status redox no desenvolvimento intrauterino. Investigamos, em ratos, o envolvimento da NADPH oxidase na elevação do estresse oxidativo materno/fetal que ocorre na inflamação induzida por administração de lipopolissacarídeo (LPS) na gestação, bem como a repercussão no desenvolvimento renal. Ratas (90 dias) foram tratadas com NaCl 0,9% (1 mL/kg, s.c., grupo Controle, n=16) ou LPS (0,5 mg/kg, s.c., n=16) nos dias 13, 15, 17 e 19 de gestação. Metade das mães recebeu tratamento com o inibidor da NADPH oxidase, apocinina (100 mg/kg, na água de beber), a partir do dia 0 de gestação. No 20º dia de gestação, as mães foram submetidas a coleta dos fetos e respectivas placentas. No fígado fetal e placentas, foram avaliados a peroxidação lipídica e os níveis de glutationa reduzida (GSH). Na placenta foram avaliadas a atividade da NADPH oxidase e a atividade da (Na⁺+K⁺)ATPase. No rim do feto foram avaliados marcadores de nefrogênese: área nefrogênica, α-actina de músculo liso (α-SMA), antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA) e expressão de Bax e Bcl 2. O peso corpóreo dos fetos oriundos das mães submetidas ao LPS foi 10% menor (P<0,01) do que dos fetos de mães Controle. A peroxidação lipídica na placenta e fígado fetal do grupo LPS foram cerca de 2 vezes maiores (P<0,001 e P<0,01, respectivamente) do que no Controle. O grupo LPS também apresentou uma redução de 40% (P<0,05) nos níveis de GSH na placenta e fígado fetal. De forma semelhante ao que foi observado na peroxidação lipídica, as placentas obtidas de mães submetidas ao LPS apresentaram elevação de cerca de duas vezes (P<0,05) na atividade da NADPH oxidase. A atividade da (Na⁺+K⁺)ATPase foi 50% menor (P<0,01) em placentas do grupo LPS em relação ao Controle. A inibição da NADPH oxidase pela apocinina preveniu a elevação do estresse oxidativo induzida pelo LPS , bem como a inibição da atividade da (Na⁺+K⁺)ATPase na placenta. Os fetos de mães submetidas a administração de LPS apresentaram maior (25%, P<0,01) área nefrogênica e menor contagem de células PCNA-positivas (20%, P<0,05) do que o grupo Controle, enquanto nenhuma alteração foi observada na imunomarcação para α-SMA no córtex renal. Além disso, o LPS aumentou em duas vezes (P<0,01) a expressão proteica de Bax e diminuiu em 50% (P<0,01) a expressão de Bcl 2. O tratamento materno com apocinina preveniu a inibição da proliferação celular e o aumento do Bax, evitando, assim, o retardo da nefrogênese. Concluímos que a produção de superóxido mediada pela NADPH oxidase é um mecanismo subjacente à elevação do estresse oxidativo no ambiente materno/fetal induzida pela inflamação materna, que pode estar correlacionada ao retardo da nefrogênese, através de alterações na proliferação e apoptose celular.