Estudo do potencial antimicrobiano de lectinas contra linhagem de Cryptococcus neoformans e biofilmes bacterianos multiespécies

Abstract

Infecções associadas ao desenvolvimento de biofilmes microbianos representam um dos grandes desafios atuais da saúde pública. As bactérias e fungos em biofilmes apresentam elevada resistência ao sistema imune do hospedeiro e à antibioticoterapia convencional. Nesse contexto, compostos bioativos isolados de plantas têm sido estudados para suprir a necessidade de novos agentes com ação antibiofilme. Cryptoccoccus neoformans e Cryptococcus gattii são leveduras encapsuladas que possuem como determinantes de virulência uma cápsula polissacarídica e a formação de biofilme, entre outros. Ambas as espécies causam a criptococose, doença distribuída mundialmente. Atualmente a principal abordagem terapêutica para o tratamento da criptococose é feita através da combinação de fármacos antifúngicos, porém os crescentes níveis de resistência à tratamentos antimicrobianos, bem como seus altos custos, toxicidade instigam a necessidade de novas alternativas. Atividades antimicrobiana e antibiofilme já foram relatadas para as lectinas CasuL e PgTeL, isoladas de Calliandra surinamensis e Punica granatum. Na presente tese, foram investigadas: a capacidade de CasuL em inibir a formação de biofilme multicepas e multiespécies de Staphylococcus aureus e Staphylococcus saprophyticcus, tanto isoladamente quanto em combinação com antibióticos comerciais (ceftazidima, cefotixina e oxacilina); e possíveis atividades fungistática e fungicida de CasuL e PgTeL frente a C. neoformans e C. gatii, bem como a capacidade de CasuL e PgTeL em inibir a formação da cápsula polissacarídica e afetar biofilmes formados pela linhagem B3501 de C. neoformans. Os resultados mostraram que quando testados isoladamente, CasuL e antibióticos comerciais não apresentaram capacidade inibitória na formação dos biofilmes bacterianos multicepas ou multiespécies. Porém, quando em conjunto com o antibiótico ceftazidima, CasuL inibiu significativamente a formação de biofilme multicepa por S. aureus UFPEDA-670 + MRSA e por S. aureus UFPEDA-670 + 8325-4. Nos ensaios de atividade anticriptocócica, CasuL não apresentou atividade fungistática nem fungicida, nem foi capaz de inibir a formação ou erradicar biofilmes. Já PgTeL apresentou atividade fungistática contra a cepa B3501 de C. neoformans (sorotipo D), com uma concentração mínima inibitória de 172 μg/mL. PgTeL também foi capaz de inibir a formação de biofilme por B3501, reduzindo significativamente a biomassa e a atividade metabólica, além de erradicar biofilmes pré-formados. PgTeL, contudo, não foi capaz de alterar o tamanho de cápsulas formadas por B3501. A ação fungistática e antibiofilme de PgTeL sobre B3501 também foram observadas por microscopia eletrônica de varredura. Em conclusão, o estudo demonstrou que: combinação de CasuL e ceftazidima pode ter aplicabilidade na inibição da formação de biofilmes multicepas por S. aureus; e que a lectina de P. granatum é uma potencial candidata a novo agente anticriptocócico, abrindo portas para estudos mais aprofundados em seu mecanismo de ação e possíves estratégias de aplicação.