Potencial antimicrobiano e anticâncer do extrato hexano e substâncias isoladas da espécie Miconia caiuia e possíveis mecanismos de ação

Abstract

Miconia caiuia, abrigada na família Melastomataceae, é conhecida nos estados de Alagoas, Pernambuco e Bahia como Miconia nordestina. O objetivo desta pesquisa foi avaliar os potenciais antimicrobiano e anticâncer do extrato hexânico e das substâncias isoladas de M. caiuia e seus possíveis mecanismos de ação. Com as partes aéreas de M. caiuia foram feitos os extratos hex, AcOEt e MeOH pelo método de maceração exaustiva. O extrato hexano (Mchex) foi escolhido para dar contiuidade aos ensaios por apresentar a melhor atividade nos estudos preliminares. O Mchex foi fracionado em cromatografia de coluna aberta com fase fixa sílica gel 60 G, sendo realizada a análise dos compostos químicos das frações obtidas por cromatografia gasosa acoplada com espectrometria de massas (CG-EM). As substâncias majoritárias identificadas no Mchex e nas frações Mchex F2 e Mchex F3 foram a β- amirina e o β-sitosterol. A atividade antimicrobiana foi avaliada através dos testes de microdiluição em caldo e o Mchex apresentou valores de CIM de 150 μg/ mL para o S. aureus MRSA (UFPEDA 709) e CIM de 70 μg/ mL para C. Glabrata (URM 4247). As frações Mchex F2 e Mchex F3 a CIM foi de 625 μg/ mL. A atividade cicatrizante in vitro do Mchex foi realizada em células L-929 e o extrato na concentração de 50 μg/ mL estimulou a proliferação das células atingindo 100% de confluência após 48 horas de exposição. O perfil toxicológico agudo do Mchex foi realizado na concentração de 2000 mg/kg (OECD 423) e o extrato não foi considerado tóxico. No teste de cicatrização in vivo, as feridas contaminadas com o UFPEDA 709 foram tratadas com as formulações de Mchex 5% e 10% por até 21 dias e o grau de contração foi de 95% e 90%, respectivamente. Na análise do estresse oxidativo dos tecidos dos animais da cicatrização in vivo (NO, MPO e MDA) o tratamento com Mchex reduziu o dano oxidativo associado à inflamação e melhorou a cicatrização da ferida in vivo o que também foi evidenciado na avaliação histopatológica. Na análise citotóxica, o Mchex foi citotóxico para as linhagens cancerígenas HCT-116, P-815, HL-60 e K-562 e apresentou percentual de inibição do crescimento celular entre 75% -100% do crescimento. A β-amirina e o β-sitosterol presentes nas frações Mchex F2 e Mchex F3 apresentaram IC50 de 0,31 μg/ mL e 0,42 μg/ mL, respectivamente, após 72 h de tratamento. Os compostos induziram a perda do padrão morfológico e dos limites celulares com disposição em agrupamentos coesos nas células HL-60 e nas células de C. glabrata. Os mecanismos de ação analisados por citometria de fluxo confirmam que as substâncias promovem o potencial transmembrânico mitocondrial e influenciam nos processos de morte por autofagia tanto das células de Candida quanto nas células de leucemia promielocítica aguda. A β-amirina e o β-sitosterol presentes no Mchex podem ser considerados promissores para o desenvolvendo de novos fármacos com potencial cicatrizante, antimicrobiano e antitumoral.