Potencial de composto híbrido de 2-isoxazolina azabicíclica em combinação com o fluconazol e de derivado 2-aminotiofeno frente a espécies de Candida

Abstract

A candidíase é uma das infecções fúngicas oportunistas mais prevalentes no mundo, causada por fungos do gênero Candida, que podem afetar diversas partes do corpo, incluindo a pele, mucosas, trato gastrointestinal e sistema geniturinário. Assim como em outras infecções microbianas, houve um aumento significativo de isolados clínicos resistentes aos tratamentos convencionais, impulsionando a busca por novas abordagens terapêuticas, incluindo a terapia combinada. Neste contexto, o presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial anti-Candida de diferentes compostos sintéticos, como híbridos moleculares contendo o núcleo de 2-isoxazolina azabicíclica e derivados de tiofeno, contra isolados de espécies epidemiologicamente relevantes para a candidemia no Brasil. Foram realizados testes frente a células planctônicas utilizando a técnica de microdiluição em caldo (M27-A4, CLSI), incluindo isolados clínicos provenientes de candidemia e isolados de referência, visando comparar os novos compostos com fluconazol e anfotericina B. Adicionalmente, testes de interação com fluconazol foram conduzidos utilizando a técnica de tabuleiro de xadrez frente ao isolado C. albicans CA2, reconhecidamente resistente ao fluconazol. Para esses testes, foram utilizados exclusivamente os híbridos de 2-isoxazolina azabicíclica, devido à interação sinérgica relatada na literatura. Adicionalmente, para os compostos com interação sinérgica, foram solicitados ao Laboratório de Experimentação in vitro e in vivo/UFPE testes de citotoxicidade frente a duas linhagens cancerígenas humanas, HeLa e HL-60, de carcinoma cervical humano e de leucemia promielocítica humana, respectivamente. Em relação aos testes envolvendo os derivados de tiofeno, após os testes de triagem frente às células planctônicas, um composto com maior espectro de ação, ou seja, ativo frente ao maior número de isolados testados, foi selecionado para ser testado frente a biofilmes maduros de diferentes espécies de Candida. Além disso, testes de toxicidade em modelo in vivo foram realizados utilizando larvas de Galleria mellonella em três concentrações diferentes (10 mg/kg, 25 mg/kg e 50 mg/kg). Em relação aos resultados, observamos que os compostos contendo 2-isoxazolina azabicíclica não foram ativos frente aos isolados de Candida spp. nas concentrações testadas (2 a 1024 μg/mL). No entanto, o composto 6-(4-terc- butilbenzoil)-4,5,6,6a-tetraidro-3a-H-pirrol[3,2-d]isoxazol-3-carboxílico(furan-2- metilideno)-hidrazida (R-155) apresentou interação sinérgica com fluconazol frente ao isolado resistente testado. Observou-se que o composto R-155 demonstrou potencial citotóxico significativo, sugerindo que o mesmo pode ser explorado como um precursor de um futuro agente anticancerígeno. Entre os oito derivados de tiofeno testados, dois foram eficazes frente a células planctônicas. Entre os dois, selecionamos o composto 2-[(3,4-diclorobenzilideno)amino]-tetraidrobenzo[b]tiofeno- 3-carbonitrila (6CN05) que apresentou concentração inibitória mínima e concentração fungicida mínima variando de 128 a 1024 μg/mL. O mesmo se mostrou ativo frente aos diferentes biofilmes na única concentração testada (1024 μg/mL), além de não ser tóxico nas três doses utilizadas no presente estudo. Com base nesses resultados, o composto 6CN05 mostra-se um potencial aliado no combate à resistência em Candida, atingindo o objetivo proposto pelo estudo. No entanto, mais testes são necessários para compreender seu mecanismo de ação e sua toxicidade em outros modelos animais.