Desenvolvimento in sílico de antígeno sintético multiepítopo a partir das oncoproteínas E5, E6 E E7 dos HPVS de alto risco 16, 18, 45, 31, 33, 58 E 52 para composição de vacina terapêutica contra o câncer cervical.

Abstract

A infecção pelo Papilomavírus Humano (HPV), especialmente pelos tipos de alto risco, é a principal causa de câncer cervical, destacando-se em países em desenvolvimento devido à ausência de programas de prevenção efetivo, em 2022, foram registrados cerca de 660.000 novos casos e 350.000 mortes, destacando a gravidade das infecções persistentes. Nesse contexto, vacinas terapêuticas baseadas em epítopos representam uma abordagem promissora para pacientes infectados, ao estimular uma resposta imune celular contra as oncoproteínas virais E5, E6 e E7, essenciais para a progressão tumoral e a evasão imunológica. Este estudo visou desenvolver um antígeno sintético multiepítopo a partir da predição de epítopos de células T para o Complexo Principal de Histocompatibilidade (MHC), direcionados aos genótipos HPV 16, 18, 45, 31, 33, 58 e 52. Foram realizadas predições de ligantes TCD8 + para MHC classe I, seguidas por análises de imunogenicidade, clusterização, conservação e cobertura populacional, utilizando ferramentas de imunoinformática para selecionar os epítopos mais promissores. Três epítopos de cada genótipo foram escolhidos, sendo um para cada oncoproteína E5, E6 e E7, totalizando 21 epítopos. A construção incluiu linkers AAY para modular a apresentação antigênica, o adjuvante TAT para aumentar a imunogenicidade e sítios de restrição que permitem a separação das proteínas. Os epítopos selecionados demonstraram alta especificidade citotóxica, com interações favoráveis nos testes de docking molecular com MHC-I, e ampla cobertura populacional, incluindo epítopos previamente validados na literatura. A modelagem estrutural indicou conformações estáveis, com resultados positivos nos testes de Ramachandran, e a análise secundária revelou características desejáveis, como peso molecular médio, estabilidade estrutural, ausência de toxicidade e propriedades antigênicas e não alergênicas. A clonagem in sílico confirmou a viabilidade da construção com enzimas de restrição específicas. Esses resultados evidenciam a robustez da construção proposta, que apresentou eficiência em diversas metodologias aplicadas, destacando-se como uma abordagem relevante para estudos futuros. A construção proposta não apenas oferece potencial terapêutico contra cânceres associados ao HPV, mas também constitui uma base metodológica valiosa para o desenvolvimento de vacinas baseadas em peptídeos ou DNA. Além disso, o banco de dados gerado contribui para a ampliação do conhecimento científico e o avanço em estratégias de imunoterapia direcionadas.