DESENVOLVIMENTO DE PLATAFORMA SENSORA PARA DETECÇÃO DE CISTATINA C EM CASOS DE LESÃO RENAL

Abstract

As doenças renais crônicas (DRC) acometem mais de 10% da população mundial e provocam lesões que prejudicam permanentemente a função renal, diminuindo a qualidade de vida e aumentando os índices de mortalidade e dependência de Terapia Renal Substitutiva (TRS). Atualmente, a Taxa de Filtração Glomerular (TFG) da Creatinina é a principal forma de identificação de DRC, mas ela é dependente da massa muscular e varia com a idade e o estilo de vida, além de dificilmente estar alterada em estágios iniciais da doença. Por outro lado, a Cistatina C é um poderoso biomarcador de lesões renais, sendo seu aumento no sangue anterior ao da creatinina e sua variação independente de idade, dieta e massa muscular. Neste projeto, uma nanoplataforma impedimétrica, baseada em uma monocamada auto-organizada de MPA (MPA-SAM) e nanopartículas de silício funcionalizadas com grupamentos amina (MCM-41-NH2), foi elaborada para imobilização orientada de anticorpos Anti-Cistatina C, visando detecção da Cistatina C sérica em amostras de pacientes com suspeita de lesão renal. As etapas de desenvolvimento do imunossensor foram caracterizadas pelas técnicas eletroquímicas de Espectroscopia de Impedância eletroquímica (EIS) e Voltametria Cíclica (VC) e por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier no modo Reflectância Total Atenuada (ATR-FT-IR). A imobilização do biorreceptor Anti-Cistatina C e a otimização da sua concentração na plataforma imunossensora, bem como sua ligação ao analito alvo, foram detectadas pela variação na resistência de transferência de carga (Rct) na técnica de EIS. A detecção de Cistatina C foi possível devido à alta área superficial e grande número de anticorpos imobilizados na superfície do MCM-41-NH2, obtendo-se um teste com alta sensibilidade. A plataforma também apresentou excelente estabilidade e cinética controlada por difusão. Por fim, a resposta eletroquímica de diferentes concentrações de Cistatina C apresentou linearidade entre 0,1 e 2 ng/mL e o limite de detecção (LOD) foi de 0,46 ng/mL. Portanto, a plataforma MPA-SAM/MCM-41-NH2 mostrou grande potencial para o diagnóstico point-of-care de lesões renais.