Desenvolvimento de plataforma nanoestruturada de sensoriamento óptico para a identificação de Candida albicans

Abstract

A frequência de infecções hospitalares por fungos patogênicos tem aumentado consideravelmente nos últimos anos, acarretando altos níveis de mortalidade. O gênero Candida é responsável por cerca de 80% das infecções fúngicas no ambiente hospitalar e constitui uma causa relevante de infecções da corrente sanguínea em pacientes imunodeprimidos internados em Unidades de Terapia Intensiva (UTI). Testes específicos para diagnóstico de infecções hematogênicas por Candida albicans possuem custos elevados e necessitam de um longo período para a obtenção de resultados, o que indica a necessidade de novas alternativas para o diagnóstico de candidemias. No presente trabalho, uma plataforma coloidal de nanopartículas de ouro foi desenvolvida para a detecção de leveduras de Candida albicans. Aqui, explora-se a interação de luz com a plataforma nanoestruturada para a identificação de leveduras. Em particular, a interação da luz com nanopartículas metálicas pode levar a uma oscilação coletiva dos elétrons do metal, induzindo um espalhamento da radiação incidente (ressonância de plasmon localizado). A plataforma de sensoriamento corresponde a uma solução aquosa com nanopartículas de ouro funcionalizadas com anticorpos monoclonais anti-candida da classe das imunoglobulinas IgG. No desenvolvimento da plataforma, foram explorados colóides com nanopartículas de 5nm e 50nm diâmetro. Moléculas de Cisteamina foram empregadas como ligantes no processo de funcionalização de anticorpos e a Glicina foi utilizada para bloquear os sítios não funcionalizados da plataforma. A plataforma e todas suas etapas de fabricação foram avaliadas por espectroscopia de absorção. Foi observado que o pico de ressonância de plasmon sofre deslocamento espectral quando Cisteamina, anticorpos, Glicina e antígenos são associados à superfície nanoestruturada de ouro. Com o sistema desenvolvido, foi possível identificar antígenos de Candida albicans (concentrações maiores que 3μg/mL) em solução aquosa, indicando a possibilidade do uso da plataforma como imunossensor.