Nanovacinas alergênicas para imunoterapia em alergia a castanha de caju

Abstract

As alergias alimentares afetam entre 6-8% da população infantil e 3-4% dos adultos em todo o mundo. No Brasil, apesar da inexistência de dados epidemiológicos robustos, estudos relatam a prevalência de até 23% de alergia alimentar. Entre as alergias alimentares, a alergia aos frutos secos (castanha de caju, amendoim, avelã, nozes, entre outros) é relativamente frequente em países em que o seu consumo é elevado, como é o caso do Brasil. Entre elas, a alergia à castanha de caju (A. occidentale) está descrita como a segunda mais comumente capaz de induzir reações adversas severas, como a anafilaxia, o que demonstra sua alta capacidade alergênica. Entretanto, ainda não existe tratamento efetivo disponível no âmbito clínico que seja capaz de reverter a resposta alérgica induzida pela castanha de caju. Uma alternativa promissora para modificar a resposta do paciente é a imunoterapia alérgeno-específica (SIT) com o uso de sistemas nanoestruturados de liberação controlada. Dentre eles, as nanopartículas poliméricas foram empregadas na SIT por serem capazes de modular e potencializar a resposta imune em direção a uma resposta protetora mais duradoura e eficaz. Neste sentido, podemos destacar os polímeros polianidridos e zeína para a preparação de nanopartículas para SIT por via oral. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi desenvolver nanopartículas poliméricas de polianidrido (NPg) e zeína (NPz) contendo o extrato da castanha de caju encapsulado, para posterior avaliação do efeito imunomodulador e eficácia terapêutica, através da realização de estudos in vitro e in vivo. As nanopartículas foram produzidas com êxito pelo método de nanoprecipitação (deslocamento do solvente), com tamanho de ≈ 200 nm, PDI de ≈ 0,2 e potencial zeta de ≈ – 40 mV. Ensaios de estabilidade e liberação in vitro demonstraram que as nanopartículas são estáveis em meio gástrico simulado, permitindo que o conteúdo proteico seja liberado apenas no meio intestinal. Macrófagos Raw 264.7 previamente tratados com NPg e NPz apresentaram manutenção de viabilidade celular, acompanhada por uma redução significativa na produção de IL-6 e TNF-α. Após imunização oral e intradérmica com NPg e NPz de camundongos Balb/c, verificou-se um aumento significante na produção de citocinas secretadas por células Th1 (IL12 e INF-γ) e diminuição significativa na produção das citocinas secretadas por células Th2 (IL-4, IL-5 e IL-13). Também foi observada um incremento na ativação de células T reguladoras (Treg) nos linfonodos mesentéricos, com aumento na produção de células Treg CD4+ Foxp3+ e CD4+ LAP+ e citocinas Treg (IL-10 e TGF-β1), avaliadas por citometria de fluxo. Diante dos resultados obtidos, a imunização de animais com NPg e NPz foi responsável pela indução de uma uma resposta imune de perfil Th1 e Treg, de maneira mais acentuada com NPg, em ambas as vias de administração, comprovando assim suas propriedades imunomoduladoras. Desta forma, estes sistemas poliméricos nanoestruturados se apresentam como alternativas terapêuticas promissoras para o tratamento clínico da alergia à castanha de caju.