Análise in silico e in vitro do potencial leishmanicida de novos derivados sintéticos híbridos isoxazolinas de seis membros/tiazolidina-2,4-diona

Abstract

A leishmaniose é uma doença negligenciada causada por parasitas protozoários pertencentes ao gênero Leishmania (Kinetoplastida: Trypanosomatidae). A doença afeta 98 países, deixando mais de 1 bilhão de pessoas em risco. O atual tratamento para essa patologia tem sérias deficiências, incluindo alto custo, via de administração, resistência aos medicamentos e, efeitos colaterais sérios, havendo, assim, a necessidade do desenvolvimento de novas quimioterapias. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi avaliar os mecanismos celulares e moleculares de novos derivados sintéticos híbridos isoxazolinas de seis membros/tiazolidina-2,4-diona com potencial atividade antiparasitária e imunomoduladora, associando ensaios in silico e in vitro. Para a avaliação in silico, foram realizados os estudos de docking molecular frente a alvos da leishmania, bem como a utilização das ferramentas online Pro-Tox II e SWISSADME, para obtenção das características físico-químicas, farmacocinéticas, farmacodinâmicas e toxicológicas dos compostos em análise. O modelo de QSAR foi obtido através da aplicação do método estatístico de correlação canônica. A citotoxicidade dos compostos foi avaliada em macrófagos da linhagem RAW 264.7, através do método do MTT. A atividade leishmanicida foi avaliada frente a formas amastigotas e promastigotas de L. infantum e L. amazonensis. O resultado do docking molecular demonstrou uma grande variação da afinidade das moléculas pelo sítio de ligação das enzimas usadas como alvos biológicos, sendo os ligantes 3G e 3H os que se destacaram em relação aos valores de score, na maior parte dos alvos avaliados. A correlação canônica gerou um modelo de QSAR estável (R2 canônico de 0,862), demonstrando principalmente uma forte correlação entre a variável independente de lipofilicidade (LogP) e a variável dependente de IC50 em L. amazonensis. A maioria dos compostos testados apresentou menos toxicidade que a Miltefosina, droga de referência utilizada no tratamento das leishmaniose. Com relação à atividade leishmanicida para a espécie de L. infantum, a molécula 3G foi o que apresentou o menor valor de IC50 (13,06μM) para promastigota. Para a espécie de L. amazonensis, o menor valor de IC50 foi do ligante 3H (10,25 μM) para promastigota. Os compostos não demonstraram atividade para a forma evolutiva de amastigota em nenhuma das espécies avaliadas. Os resultados obtidos pelos ensaios in vitro corroboram com os resultados encontrados pelo docking molecular, identificando as moléculas 3G e 3H como as mais promissoras como leishmanicidas, e que apresentam mais afinidade (in silico) pela maior parte dos alvos avaliados. Os compostos 3G e 3H foram capazes de induzir a produção de IL-06 e IL-10, importantes para o perfil Th2 e a regulação da atividade inflamatória. Diante disso, as abordagens aplicadas neste trabalho permitiram alcançar, em conjunto, um maior entendimento do potencial leishmanicida destas moléculas.