Avaliação do efeito de polimorfismos sobre a atividade da LCR de diferentes variantes do papilomavirus humano tipo 16

Abstract

Infecções persistentes por Papilomavírus Humano (HPV) de alto risco são um dos pré- requisitos para o desênenvolvimento do câncer cervical, que é a quarta causa de morte no mundo. Dentre os diferentes tipos de HPV, o HPV 16 é o mais incidente, tanto em países desenvolvidos quanto em países em desenvolvimento. O genoma do HPV é composto por três regiões, a Região Longa de Controle (LCR), a região Early, e a região Late. Variações na região LCR do HPV podem afetar a oncogenicidade, progressão e persistência da infecção viral, inclusive causando alterações nos sítios de ligação aos fatores transcricionais E2, YY1, NF-1 e AP1. Neste estudo, realizou-se uma avaliação dos efeitos de variantes presentes na região promotora da LCR do HPV 16 circulante no Estado de Pernambuco. Para isso, foram selecionados três isolados de diferentes variantes da LCR do HPV 16, os isolados 49, 64, e 74. Elas foram clonadas no vetor pGEM-T Easy e subclonadas no vetor de expressão pNL1.1 (Nluc), e transfectados em células HeLa. Foi realizado um modelo de ensaio de luminescência das amostras observando como as variantes de LCR afetam a expressão do gene repórter Nluc. Dentre os isolados estudados, o 64 (variante D), que apresenta o maior número de alterações em sítios de ligação para fatores de transcrição, foi o que mais reprimiu a expressão do gene repórter Nluc. O isolado 49 (variante A), que apresenta o menor número de alterações, possuiu a segunda menor expressão do gene repórter. Já o isolado 74 (variante C) foi quem menos reprimiu a atividade do gene repórter Nluc. A análise estatística não mostrou diferenças significativa entre as regiões LCR polimórficas, com valor de p=0,53. Assim, um perfil mais refinado das variantes de LCR do HPV 16 e sua importância para o prognóstico de lesões cervicais começa a ser traçado.