Desenvolvimento e caracterização de um modelo animal imunocompetente para avaliação de uma candidata vacinal de DNA contra o Vírus Chikungunya

Abstract

O vírus Chikungunya (CHIKV) é um arbovírus que ressurgiu em todo mundo e por conseguinte elevou o impacto global para a saúde pública. Esse vírus é transmitido principalmente pelos vetores: Aedes aegypti e Ae. albopictus. Para estudo das manifestações clínicas, é preciso produzir modelos in vitro e in vivo com o objetivo de estudar os mecanismos da patogênese e transmissão viral, a fim de auxiliar no desenvolvimento de vacinas e antivirais. Com isso, este estudo teve como objetivo desenvolver e caracterizar um modelo animal imunocompetente para avaliar a patogênese e a eficácia vacinal contra a Chikungunya. Primeiramente, foi realizada a caracterização da infecção, utilizando camundongos selvagens (WT). Os animais foram divididos em 3 grupos, sendo 9 animais por grupo, um grupo controle inoculado somente com anticorpo, um infectado com CHIKV e outro grupo inoculado com o anticorpo associado ao CHIKV pela via intracraniana através do forame pós-glenoide. Os animais foram identificados e observados diariamente por 14 dias, sendo anotados todos os parâmetros clínicos. Foi coletado sangue em dias alternados para detecção da curva virêmica. Os camundongos infectados mostraram sinais de doença caracterizados por postura curvada e pelo arrepiado em ambos os grupos de infecção. Apesar dos animais dos grupos CHIKV e CHIKV+AC não terem apresentado letalidade, o pico virêmico foi detectado no D2 p.i. com valor do Ct mais alto para o grupo associado ao anticorpo, sugerindo uma potencialização da infecção. Após o estabelecimento do modelo, um segundo experimento foi realizado no qual se utilizou animais imunizados no intervalo de 15 dias (D0, D15, D30) e desafiado 15 dias após a última imunização. Os animais foram divididos em 4 grupos, sendo 5 animais por grupo, um grupo imunizado com a vacina teste (G1), outro imunizado com a vacina sem o C-LAMP (G2), um controle negativo, imunizado com PBS (G3); e um controle positivo, imunizado com o vírus inativado (G4). Somente no G2 não apresentou viremia, sugerindo tanto a efetividade do modelo frente à infecção quanto a eficiência vacinal em proteger contra a viremia. Portanto, esse novo modelo resultou em viremia robusta, ausência de morte e em suposta proteção da vacina de DNA, sendo útil em trabalhos com CHIKV.