Desenvolvimento e avaliação de novas proteínas quiméricas recombinantes baseadas em epítopos imunogênicos para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina e humana

Abstract

A leishmaniose visceral (LV) é uma doença grave e o diagnóstico precoce é fundamental para o tratamento adequado. No entanto, a falta de métodos eficientes e de baixo custo tem sido um desafio tanto para a doença humana quanto para o cão, seu principal reservatório. Atualmente, os testes sorológicos que utilizam antígenos recombinantes têm a vantagem de combinar sensibilidade e especificidade, além de serem relativamente fáceis de serem realizados. A utilização de um único antígeno para o diagnóstico da leishmaniose visceral tanto em humanos como em cães poderia reduzir os custos de produção e distribuição dos testes, facilitando e possibilitando um tratamento mais rápido. O objetivo deste estudo foi desenvolver e avaliar um novo antígeno quimérico recombinante (Q8), baseado em uma proteína quimérica previamente desenvolvida (Q5), mais adição de fragmentos de duas outras proteínas antigênicas, Lci5 e Lci13 da Leishmania infantum. O primeiro conjunto de dados do estudo demonstraram que a Q5 necessita de melhorias adicionais em sua sequência, indicando uma sensibilidade inferior (62%) com os soros caninos assintomáticos positivos para LV. Em um segundo momento, o potencial diagnóstico da Q8 foi avaliado em comparação com a sua variante Q8SX2 e Q5, utilizando soros de cães e indivíduos portadores de leishmaniose visceral. A Q8 mostrou níveis de sensibilidade superiores à Q8SX2 e Q5 no diagnóstico da LV em cães e humanos, apresentando 96,3% e 97,3%, enquanto a Q8SX2 apresentou 93,5% e 96%, e a Q5, 87% e 82,6%, respectivamente. Ainda, a Q8 foi capaz de identificar cães assintomáticos (93,7%) sem apresentar resultados falsos positivos e sem reatividade cruzada com leishmaniose tegumentar. Além disso, a Q8 demonstrou resultados satisfatórios no ensaio de ELISA usando proteína A, tanto para humanos como para cães. Portanto, esse novo antígeno apresenta potencial para o diagnóstico de cães e humanos afetados com LV, podendo ser uma alternativa viável aos ensaios atualmente recomendados no Brasil.