Análise da expressão diferencial de manoproteínas e floculinas com potencial função de adesinas em Trichosporon asahii

Abstract

Trichosporon asahii é uma levedura do filo Basidiomycota e representa a espécie mais prevalente em infecções invasivas causadas por Trichosporon spp., associadas a taxas de mortalidade que variam entre 42% à 95%. Essas infecções acometem predominantemente pacientes imunocomprometidos, especialmente aqueles com neoplasias hematológicas, neutropenia ou em uso de dispositivos médicos invasivos. Com o objetivo de identificar potenciais adesinas homólogas em T. asahii pertencentes às famílias das floculinas e manoproteínas, foram utilizados genes dessas famílias descritos em Cryptococcus neoformans. Foram analisadas duas cepas controle de T. asahii (CBS2479 e CBS7631) e duas cepas clínicas (L2585 e L773). A ferramenta tBLASTn (NCBI) foi empregada para avaliar a similaridade entre as sequências gênicas de C. neoformans e o genoma de T. asahii. As modificações pós-traducionais foram previstas com o servidor CBS Prediction. A identificação de motivos de adesão e a modelagem tridimensional foram realizadas com o PyMOL e o AlphaFold, respectivamente. A morfologia celular de cada cepa foi observada por microscopia óptica de campo claro. As cepas foram cultivadas em condições planctônicas e de biofilme, e a expressão gênica foi avaliada por qPCR utilizando o equipamento Applied Biosystems Step-One Plus. Os resultados revelaram a presença de quatro floculinas em T. asahii (Dha1p, Dha2p, Cpl1p e Cfl1p) e quatro manoproteínas (Mp84p, Mp88p, Mp98p e Cmp1p), todas preditas como proteínas com peptídeo sinal, O-glicosilação, N-glicosilação e localização externa à parede celular fúngica. A cepa CBS2479 apresentou morfologia predominantemente de levedura (blastoconídios), enquanto a cepa L2585 exibiu maior formação de hifas. Em comparação com a cepa controle, observou-se menor expressão das floculinas e maior expressão das manoproteínas. A expressão das floculinas foi aumentada em condição de biofilme, enquanto as manoproteínas apresentaram maior expressão em condição planctônica. Conclui-se, pela primeira vez, que as floculinas em T. asahii estão mais associadas à formação de biofilme, ao passo que as manoproteínas se relacionam principalmente com a condição planctônica.