Avaliação dos mecanismos antineoplásicos de derivados de tiossemicarbazona nas linhagens celulares de leucemia aguda HL 60 e CCRF-CEM in vitro e in sílico

Abstract

A leucemia mieloide aguda (LMA) e a leucemia linfoblástica aguda (LLA) são neoplasias hematológicas agressivas, frequentemente resistentes às terapias convencionais, o que limita as opções de tratamento, impactando a sobrevida dos pacientes. Diante disso, é essencial a busca por moléculas com ação eficaz e seletiva. Os derivados de tiossemicarbazona DT-44 e DT-46, demonstram potencial atividade anticâncer ao induzir apoptose em neoplasias, destacando-se como opções promissoras para o tratamento da leucemia promielocítica aguda e leucemia linfoblástica aguda de células T, com efeitos múltiplos de ação antitumoral. Portanto, o presente estudo teve o objetivo de avaliar os efeitos antineoplásicos dos derivados DT-44 e DT-46 nas linhagens celulares de leucemias agudas HL-60 e CCRF-CEM in vitro e in sílico. O efeito citotóxico dos compostos em HL-60 e CCRF-CEM foi avaliado em 24, 48 e 72 horas, determinando-se IC50 e índice de seletividade por ensaios de viabilidade. A citometria de fluxo analisou morte celular, ciclo celular, formação de ROS, proliferação e ativação das caspases 3/7 em diferentes tempos e concentrações. Análises in sílico avaliaram parâmetros ADMET, farmacocinética e possíveis alvos moleculares.Os resultados demonstraram que os derivados DT-44 e DT-46 apresentam efeitos citotóxicos nas linhagens HL-60 e CCRF-CEM. Para o DT 44, os valores de IC50 em HL-60 foram 9,07µM, 9,08µM e 8,11µM em 24, 48 e 72 horas, respectivamente, enquanto em CCRF-CEM foram 41,26µM, 26,38µM e 14,27µM. Já o DT-46 apresentou IC50 de 23,97µM, 18,6µM e 11,11µM em HL-60, e 19,73µM, 15,3µM e 11,55µM em CCRF-CEM nos mesmos intervalos. Os derivados DT-44 e DT-46 induziram apoptose em HL-60 e CCRF-CEM nas concentrações de IC50 e ½IC50. Eles também alteraram o ciclo celular, aumentando o arraste celular para Pré-G0 em HL-60, enquanto, em CCRF-CEM, o DT 46 reduziu G0-G1 e G2-M a partir de 24 horas, com efeitos ampliados em 48 horas. A exposição por até 48 horas gerou estresse celular com formação de ROS, e após 72 horas, reduziu a proliferação. Além disso, ativaram as caspases-3/7 em ambas as linhagens após 24 e 48 horas.As análises in sílico indicaram que os compostos interagem com proteínas-chave da apoptose e progressão das leucemias agudas. Eles apresentam alta absorção, não são hepatotóxicos, não atravessam a barreira hematoencefálica, seguem a regra de Lipinski e não são substratos da P-glicoproteína, apesar da biodisponibilidade oral limitada. Assim, DT-44 e DT-46 mostram forte potencial antineoplásico contra HL-60 e CCRF-CEM, atuando em múltiplos alvos celulares e sendo candidatos promissores para novas terapias.